Les pompes péristaltiques et collecteurs de fraction de LAMBDA sont utilisés conjointement en chromatographie liquide. Les pompes péristaltiques de LAMBDA sont programmables et peuvent être commandées par un signal externe. Elles peuvent ainsi produire de gradients d'élution linéaires, en escalier ou segmentés.
La pompe péristaltique de LAMBDA alimente la colonne de chromatographie en phase liquides à un débit constant, reproductible et sans pulsation.
Les élutions isocratiques nécessitent un tampon et une seule pompe péristaltique.
Par contre les gradients d'élution nécessitent l'emploi de deux tampons et de une ou deux pompes péristaltiques:
"Les biochimistes recommandent les pompes péristaltiques de LAMBDA car elles garantissent une alimentation sans pulsation de la phase mobile."
Gradient d'élution avec deux pompes | | Gradient d'élution avec une seule pompe |
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Deux pompes péristaltiques de LAMBDA sont utilisées pour mélanger deux solutions pour produire un gradient d'élution. - Les changements de composition en fonction du temps peuvent être programmés directement sur la pompe péristaltique de LAMBDA ou ils peuvent être réalisés et visualisés à partir du logiciel de contrôle PNet en temps réel.
- Le logiciel de contrôle et de processus PNet permet de commander les pompes péristaltiques à distance et de générer les gradients.
- Le mélange d'éluants passe à travers la colonne de chromatographie et les composants sont séparés.
- L'éluat de la colonne passe dans le détecteur qui mesure par exemple le pH, l'absorption à 280 nm ou la conductivité.
- Le collecteur de fractions automatisé OMNICOLL de LAMBDA répartit les différentes fractions dans des récipients en fonction du temps programmé ou du nombre de gouttes recueillies.
| | Les gradients d'élution peuvent aussi être réalisés avec une seule pompe péristaltique: les récipients contenant les tampons d'élution A & B sont connectés entre eux par un siphon ou un tube dans leur fond, lui-même équipé d'une vanne permettant d'ajuster le débit. - Le tampon d'élution A est constamment aspiré dans le récipient B parfaitement agité, modifiant ainsi sa concentration.
- La pompe péristaltique de LAMBDA alimente la colonne de chromatographie avec le mélange d'élution.
- L'éluat de la colonne passe dans le détecteur qui mesure par exemple le pH, l'absorption à 280 nm ou la conductivité.
- A la sortie du détecteur, le liquide est réparti en différentes fractions par le collecteur de fractions OMNICOLL dans différents récipients (ex.: bouteilles, béchers, tubes, flacons, etc.).
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Qualités nécessaires aux pompes utilisées avec les colonnes de chromatographie
Les qualités les plus importantes des pompes utilisées avec les colonnes de chromatographie sont: - Un débit constant et reproductible
Pour avoir des temps de rétention reproductibles d'une chromatographie à l'autre, il faut une bonne reproductibilité et constance des débits.
- Débit sans pulsation
La phase stationnaire supporte mal les surpressions et la ligne de base du détecteur doit rester stable.
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D'autres informations au sujet de la chromatographie, le collecteur de fractions et la connexion des pompes péristaltiques est disponible à la page www.lambda-instruments.com/fraction-collector/.